徠卡超薄切片機(jī)省去了普通超簿切片法中繁雜的化學(xué)固定與包埋操作，在細(xì)胞化學(xué)研究中有著特殊的用途。為了很好保存形態(tài)結(jié)構(gòu)，必須使游離水形成玻璃態(tài)的冰，防止產(chǎn)生冰晶。這就要求很高的冰凍速率（~度/秒），這對于傳熱性能差的生物材料來說是困難的。一般除了盡可能地提高冷凍速率外，還可考慮采用盡可能小的樣品尺寸（小于1立方毫米），對樣品進(jìn)行冷凍保護(hù)處理等，但通常也只能在樣品表面幾微米到幾十微米范圍內(nèi)能達(dá)到玻璃態(tài)。更深層將會因冷凍速率低而產(chǎn)生冰晶損傷。

 

　　徠卡超薄切片機(jī)快速冷凍常用的方法有三種：

　　①用液氮直接冷凍在樣品架上滴上一滴緩沖液，放上預(yù)處理過的樣品，一起直接放入液氮冷凍。這種方法如上述由于存在汽泡絕熱層，冷凍速率低，效果不佳。

　?、陂g接冷凍法采用某些低熔點(diǎn)，高沸點(diǎn)，高熱容量及傳熱好的中間冷媒，如：乙烷、異戊烷、丙烷、氟里昂等。將一金屬容器置于液氮中，再將中間冷媒注入容器中，待中間冷媒冷卻后，然后把樣品投入個間冷媒的容器中冷凍。由于這些冷媒不會沸騰和形成絕熱泡層，因此，冷凍速率高，效果較佳。

　?、劢鹦冀佑|冷凍法將一銅塊至于液氮中，待溫度平衡后，取出銅塊并將樣品與它接觸0.3~0.5秒，使樣品冷凍后，投入液氮中，繼續(xù)冷凍。此法出于樣品預(yù)先冷凍，樣品放入液統(tǒng)中不會產(chǎn)生絕熱的汽泡層，冷凍效果較好，特別適用于無溶液制備法。

 

　　徠卡超薄切片機(jī)在進(jìn)行切片之前要將樣品塊修整好。方法可用徠卡切片機(jī)修塊；也可在液氮中用一長柄刀片修整，但這兩種方法都不易掌握，效果不佳。較合適的方法是：將組織塊在戊二強(qiáng)固定的過程中，用刀片修整成適合于切片的梯形，并仔細(xì)放置在樣品架上進(jìn)行冷凍。